{"id":3482,"date":"2014-02-04T17:17:28","date_gmt":"2014-02-04T16:17:28","guid":{"rendered":"http:\/\/bmscience.altervista.org\/blog\/?p=3482"},"modified":"2024-03-18T21:49:49","modified_gmt":"2024-03-18T20:49:49","slug":"la-cromatografia-liquida-ad-alta-prestazione-hplc","status":"publish","type":"post","link":"https:\/\/bmscience.net\/blog\/la-cromatografia-liquida-ad-alta-prestazione-hplc\/","title":{"rendered":"La Cromatografia liquida ad alta prestazione (HPLC)"},"content":{"rendered":"
\n
\"HPLC\"<\/a><\/figure>\n<\/div>\n\n\n

La cromatografia liquida ad alta prestazione<\/strong> (High Performance Liquid Chromatography<\/em>) o cromatografia liquida ad alta pressione<\/strong> (High Pressure Liquid Chromatography<\/em>) \u00e8 un potente strumento di analisi. In questo articolo esamineremo come si esegue e mostreremo come funziona la colonna cromatografica.<\/p>\n\n\n\n

L’HPLC<\/strong> \u00e8 una tecnica in chimica analitica utilizzata per separare e purificare i componenti in una miscela, per identificare ogni componente e per quantificare ciascun componente. Essa si basa su pompe in cui passa un solvente liquido pressurizzato contenente la miscela campione attraverso una colonna riempita con un materiale adsorbente<\/strong> solido. Ogni componente nel campione interagisce in modo diverso con il materiale adsorbente, causando diversi tempi di uscita per i diversi componenti e porta alla separazione dei componenti mentre scorrono sulla colonna cromatografica <\/strong>nella quale vengono trattenuti (ogni sostanza si trattiene in modo diverso).<\/p>\n\n\n

\n
\"\"
Fase Stazionaria \u2013 Colonna Cromatografica<\/figcaption><\/figure>\n<\/div>\n\n\n

La Cromatografia<\/strong> pu\u00f2 essere definita come un processo di trasferimento di massa che coinvolge l’adsorbimento. l’HPLC si basa su pompe in cui circola un liquido in pressione detto Fase Mobile<\/strong> ed una miscela campione attraverso una colonna riempita con un assorbente detta Fase Stazionaria<\/strong>, che porta alla separazione dei componenti del campione. Il componente attivo della colonna, l’assorbente<\/strong>, \u00e8 tipicamente un materiale granulare costituito da particelle solide (ad esempio silice, polimeri, ecc) di dimensioni 2-50 micrometri. I componenti della miscela campione sono separati gli uni dagli altri a causa dei diversi gradi di interazione con le particelle adsorbenti. Il liquido in pressione<\/strong> \u00e8 tipicamente una miscela di solventi (ad esempio acqua, acetonitrile e \/ o metanolo). La sua composizione e la temperatura gioca un ruolo importante nel processo di separazione influenzando le interazioni che avvengono tra i componenti del campione e assorbente. Queste interazioni sono di natura fisica, come dispersiva, dipolo-dipolo e ionica, pi\u00f9 spesso una loro combinazione.<\/p><\/p>\n\n\n

\"\"<\/a><\/div>\n\n\n

L’HPLC si distingue dalla tradizionale (“bassa”) cromatografia liquida perch\u00e9 le pressioni operative sono significativamente superiori (50-350 atmosfere), mentre la cromatografia liquida ordinaria<\/strong> si basa tipicamente sulla forza di gravit\u00e0 per far circolare la fase mobile attraverso la colonna. A causa della piccola quantit\u00e0 di campione separato nell’HPLC, le dimensioni tipiche della colonna sono 2,1-4,6 mm di diametro e 30-250 mm di lunghezza. Inoltre le colonne HPLC sono realizzate con particelle adsorbenti pi\u00f9 piccole (2-50 micrometri mediamente). Questo d\u00e0 all’HPLC un potere di risoluzione superiore nel separare le miscele, \u00e8 per questo che \u00e8 una tecnica cromatografica<\/strong> molto conosciuta.<\/p><\/p>\n\n\n

\n
\"\"
Pompa HPLC.
<\/figcaption><\/figure>\n<\/div>\n\n\n

Lo schema dello strumento di un HPLC comprende tipicamente un campionatore, delle pompe e un rivelatore. Il campionatore<\/strong> porta la miscela campione nel flusso di fase mobile che lo trasporta nella colonna. Le pompe<\/strong> forniscono la portata desiderata e la composizione della fase mobile attraverso la colonna. Il rilevatore<\/strong> \u00e8 un calcolatore che permette una analisi in continuo dell’uscita della colonna e quindi di poter identificare le sostanze iniettate. Esso genera un segnale proporzionale alla quantit\u00e0 di componente del campione emergente dalla colonna, permettendo quindi anche una analisi quantitativa<\/strong> dei componenti del campione. Un microprocessore<\/strong> digitale<\/strong> ed un software utente consente di controllare lo strumento HPLC, programmare e fornire l’analisi dei dati. Vari rivelatori sono di uso comune, come i rivelatori ad assorbenza, i rivelatori a fluorescenza ed i rivelatori a spettrometro di massa. La maggior parte degli strumenti HPLC hanno anche un forno a colonna che permette di regolare la temperatura della separazione.<\/p><\/p>\n\n\n

\"\"<\/a><\/div>","protected":false},"excerpt":{"rendered":"

La cromatografia liquida ad alta prestazione (High Performance Liquid Chromatography) o cromatografia liquida ad alta pressione (High Pressure Liquid Chromatography) \u00e8 un potente strumento di analisi. In questo articolo esamineremo come si esegue e mostreremo come funziona la colonna cromatografica. L’HPLC \u00e8 una tecnica in chimica analitica utilizzata per separare e purificare i componenti in…<\/p>\n

Continue reading La Cromatografia liquida ad alta prestazione (HPLC)<\/span><\/a><\/p>\n","protected":false},"author":4,"featured_media":10022,"comment_status":"open","ping_status":"open","sticky":false,"template":"","format":"standard","meta":{"advgb_blocks_editor_width":"","advgb_blocks_columns_visual_guide":"","footnotes":""},"categories":[50],"tags":[1212,2092,2094,2095,2096,3072,3074,3734,4681,6414],"class_list":["post-3482","post","type-post","status-publish","format-standard","has-post-thumbnail","hentry","category-chimica-analitica","tag-campionatore","tag-cromatografia","tag-cromatografia-liquida-ad-alta-pressione","tag-cromatografia-liquida-ad-alta-prestazione","tag-cromatografia-liquida-ordinaria","tag-fase-mobile","tag-fase-stazionaria","tag-hplc","tag-materiale-adsorbente","tag-rilevatore","entry"],"author_meta":{"display_name":"Raffo Coco","author_link":"https:\/\/bmscience.net\/blog\/author\/raffo\/"},"featured_img":"https:\/\/bmscience.net\/blog\/wp-content\/uploads\/2014\/02\/HPLC2-300x172.jpg","coauthors":[],"tax_additional":{"categories":{"linked":["Chimica Analitica<\/a>"],"unlinked":["Chimica Analitica<\/span>"]},"tags":{"linked":["campionatore<\/a>","cromatografia<\/a>","cromatografia liquida ad alta pressione<\/a>","cromatografia liquida ad alta prestazione<\/a>","cromatografia liquida ordinaria<\/a>","Fase Mobile<\/a>","fase stazionaria<\/a>","HPLC<\/a>","materiale adsorbente<\/a>","rilevatore<\/a>"],"unlinked":["campionatore<\/span>","cromatografia<\/span>","cromatografia liquida ad alta pressione<\/span>","cromatografia liquida ad alta prestazione<\/span>","cromatografia liquida ordinaria<\/span>","Fase Mobile<\/span>","fase stazionaria<\/span>","HPLC<\/span>","materiale adsorbente<\/span>","rilevatore<\/span>"]}},"comment_count":"0","relative_dates":{"created":"Pubblicato 12 anni fa","modified":"Aggiornato 2 anni fa"},"absolute_dates":{"created":"Pubblicato il 04\/02\/2014","modified":"Aggiornato il 18\/03\/2024"},"absolute_dates_time":{"created":"Pubblicato il 04\/02\/2014 17:17","modified":"Aggiornato il 18\/03\/2024 21:49"},"featured_img_caption":"","series_order":"","_links":{"self":[{"href":"https:\/\/bmscience.net\/blog\/wp-json\/wp\/v2\/posts\/3482","targetHints":{"allow":["GET"]}}],"collection":[{"href":"https:\/\/bmscience.net\/blog\/wp-json\/wp\/v2\/posts"}],"about":[{"href":"https:\/\/bmscience.net\/blog\/wp-json\/wp\/v2\/types\/post"}],"author":[{"embeddable":true,"href":"https:\/\/bmscience.net\/blog\/wp-json\/wp\/v2\/users\/4"}],"replies":[{"embeddable":true,"href":"https:\/\/bmscience.net\/blog\/wp-json\/wp\/v2\/comments?post=3482"}],"version-history":[{"count":0,"href":"https:\/\/bmscience.net\/blog\/wp-json\/wp\/v2\/posts\/3482\/revisions"}],"wp:featuredmedia":[{"embeddable":true,"href":"https:\/\/bmscience.net\/blog\/wp-json\/wp\/v2\/media\/10022"}],"wp:attachment":[{"href":"https:\/\/bmscience.net\/blog\/wp-json\/wp\/v2\/media?parent=3482"}],"wp:term":[{"taxonomy":"category","embeddable":true,"href":"https:\/\/bmscience.net\/blog\/wp-json\/wp\/v2\/categories?post=3482"},{"taxonomy":"post_tag","embeddable":true,"href":"https:\/\/bmscience.net\/blog\/wp-json\/wp\/v2\/tags?post=3482"}],"curies":[{"name":"wp","href":"https:\/\/api.w.org\/{rel}","templated":true}]}}