{"id":9465,"date":"2015-05-27T18:58:57","date_gmt":"2015-05-27T16:58:57","guid":{"rendered":"http:\/\/www.bmscience.net\/blog\/?p=9465"},"modified":"2024-03-04T17:16:45","modified_gmt":"2024-03-04T16:16:45","slug":"colorazione-di-un-preparato-istologico","status":"publish","type":"post","link":"https:\/\/bmscience.net\/blog\/colorazione-di-un-preparato-istologico\/","title":{"rendered":"Colorazione di un preparato istologico"},"content":{"rendered":"<div class=\"wp-block-image\">\n<figure class=\"alignright is-resized\"><a href=\"http:\/\/www.bmscience.net\/blog\/wp-content\/uploads\/2015\/05\/Tissue_processing_-_Tissue_sections_on_slides_are_stained_on_an_automated_stainer.jpg\"><img decoding=\"async\" src=\"http:\/\/www.bmscience.net\/blog\/wp-content\/uploads\/2015\/05\/Tissue_processing_-_Tissue_sections_on_slides_are_stained_on_an_automated_stainer.jpg\" alt=\"Tissue_processing_-_Tissue_sections_on_slides_are_stained_on_an_automated_stainer\" class=\"wp-image-9474\" style=\"width:252px;height:auto\"\/><\/a><\/figure>\n<\/div>\n\n\n<p class=\"has-text-align-left\">La <strong>colorazione<\/strong> \u00e8 l&#8217;ultima fase della <a href=\"http:\/\/www.bmscience.net\/blog\/preparazione-di-campioni-istologici\/\">preparazione di un campione istologico<\/a>. Il campione che ha subito fissazione, disidratazione, diafanizzazione, inclusione ed \u00e8 stato sezionato, va poi colorato.<br>La colorazione \u00e8 un processo fondamentale perch\u00e9 permette di osservare fisicamente un campione e distinguere le sue componenti in base al diverso tipo di colorante utilizzato.<br>Quando si parla di colorazione bisogna fare una distinzione in quelle che sono le&nbsp;<strong>tecniche di colorazione&nbsp;<\/strong>e i&nbsp;<strong>coloranti.<br><\/strong>In campo istologico ci sono tre importanti&nbsp;tecniche di colorazione: colorazione istologica, istochimica e immunoistochimica.<\/p>\n\n\n\n<ul class=\"wp-block-list\">\n<li>La <strong>colorazione istologica<\/strong> permette di mettere in evidenza le caratteristiche morfologiche dei tessuti, permette quindi di studiare la struttura di un tessuto. Questa tecnica di colorazione utilizza tre tipi di coloranti: bicromici, tricromici e&nbsp;elettivi.<\/li>\n\n\n\n<li>La&nbsp;<strong>colorazione istochimica<\/strong> mette in evidenza le caratteristiche chimiche di un tessuto e si ottiene andando a sviluppare una vera e propria reazione chimica, il cui precipitato viene visto al microscopio.<\/li>\n\n\n\n<li>La&nbsp;<strong>colorazione immunoistochimica&nbsp;<\/strong>\u00e8 una colorazione pi\u00f9 specifica che mette in evidenza gli specifici antigeni presenti nelle cellule e nei tessuti.<\/li>\n<\/ul>\n\n\n<div id=\"bmscience2194809671\" style=\"margin-top: 15px;margin-bottom: 15px;margin-left: auto;margin-right: auto;text-align: center;\"><a href=\"https:\/\/amzn.to\/45vV8ex\" target=\"_blank\" aria-label=\"b2d64cbc-0053-4f82-9825-9170077165e7._CR0,0,3000,600_SX1920_\"><img loading=\"lazy\" decoding=\"async\" src=\"https:\/\/bmscience.net\/blog\/wp-content\/uploads\/2025\/06\/b2d64cbc-0053-4f82-9825-9170077165e7._CR003000600_SX1920_.jpg\" alt=\"\"  srcset=\"https:\/\/bmscience.net\/blog\/wp-content\/uploads\/2025\/06\/b2d64cbc-0053-4f82-9825-9170077165e7._CR003000600_SX1920_.jpg 1920w, https:\/\/bmscience.net\/blog\/wp-content\/uploads\/2025\/06\/b2d64cbc-0053-4f82-9825-9170077165e7._CR003000600_SX1920_-300x60.jpg 300w, https:\/\/bmscience.net\/blog\/wp-content\/uploads\/2025\/06\/b2d64cbc-0053-4f82-9825-9170077165e7._CR003000600_SX1920_-1024x205.jpg 1024w, https:\/\/bmscience.net\/blog\/wp-content\/uploads\/2025\/06\/b2d64cbc-0053-4f82-9825-9170077165e7._CR003000600_SX1920_-768x154.jpg 768w, https:\/\/bmscience.net\/blog\/wp-content\/uploads\/2025\/06\/b2d64cbc-0053-4f82-9825-9170077165e7._CR003000600_SX1920_-1536x307.jpg 1536w\" sizes=\"auto, (max-width: 1920px) 100vw, 1920px\" width=\"1920\" height=\"384\"  style=\"display: inline-block;\" \/><\/a><\/div>\n\n\n<h3 id=\"rtoc-1\"  class=\"wp-block-heading\">COLORAZIONI ISTOLOGICHE:<\/h3>\n\n\n\n<p class=\"has-text-align-left\">Una colorazione istologica fondamentale \u00e8 l&#8217;<strong>Azan-Mallory<\/strong>&nbsp;basata essenzialmente su tre colori:<\/p>\n\n\n\n<ul class=\"wp-block-list\">\n<li>l&#8217;<strong>Azocarminio<\/strong> che permette di colorare delle strutture acide come il nucleo o in minor misure il citoplasma;<\/li>\n\n\n\n<li>il <strong>Blu di Anilina<\/strong> che \u00e8 un colorante acido che permette di colorare delle strutture come fibre di collagene e muco;<\/li>\n\n\n\n<li>l&#8217;<strong>Orange G<\/strong> ha stessa funzione del blu di anilina.<\/li>\n<\/ul>\n\n\n\n<p class=\"has-text-align-left\">Tuttavia l&#8217;Azan-Mallory \u00e8 formata essenzialmente da due parti: l&#8217;Azocarminio e la miscela policroma di Mallory (formata da blu di anilina, orange G e acido ossalico).<\/p>\n\n\n<div class=\"wp-block-image\">\n<figure class=\"alignright is-resized\"><a href=\"http:\/\/www.bmscience.net\/blog\/wp-content\/uploads\/2015\/05\/Colonic_carcinoid_1_Endoscopic_resection.jpg\"><img loading=\"lazy\" decoding=\"async\" width=\"2040\" height=\"1536\" src=\"http:\/\/www.bmscience.net\/blog\/wp-content\/uploads\/2015\/05\/Colonic_carcinoid_1_Endoscopic_resection.jpg\" alt=\"\" class=\"wp-image-9476\" style=\"width:327px;height:auto\" srcset=\"https:\/\/bmscience.net\/blog\/wp-content\/uploads\/2015\/05\/Colonic_carcinoid_1_Endoscopic_resection.jpg 2040w, https:\/\/bmscience.net\/blog\/wp-content\/uploads\/2015\/05\/Colonic_carcinoid_1_Endoscopic_resection-300x226.jpg 300w, https:\/\/bmscience.net\/blog\/wp-content\/uploads\/2015\/05\/Colonic_carcinoid_1_Endoscopic_resection-1024x771.jpg 1024w, https:\/\/bmscience.net\/blog\/wp-content\/uploads\/2015\/05\/Colonic_carcinoid_1_Endoscopic_resection-768x578.jpg 768w, https:\/\/bmscience.net\/blog\/wp-content\/uploads\/2015\/05\/Colonic_carcinoid_1_Endoscopic_resection-1536x1157.jpg 1536w\" sizes=\"auto, (max-width: 2040px) 100vw, 2040px\" \/><\/a><\/figure>\n<\/div>\n\n\n<p class=\"has-text-align-left\">La colorazione probabilmente pi\u00f9 impiegata in istologia \u00e8 l&#8217;<strong>Ematossilina-Eosina<\/strong>, una colorazione bicromica che sfrutta le propriet\u00e0 acide e basiche delle cellule. E&#8217; formata da due coloranti:<\/p>\n\n\n\n<ul class=\"wp-block-list\">\n<li>l&#8217;<strong>ematossilina<\/strong> che conferisce una colorazione blu-violacea ed \u00e8 un colorante basico, acidofico che si lega alle strutture acide della cellula come il nucleo formato da DNA, o il citoplasma delle cellule pi\u00f9 attive che contengono molti ribosomi, formati da RNA;<\/li>\n\n\n\n<li>l&#8217;<strong>eosina<\/strong>&nbsp;che conferisce una colorazione rossa-rosa-arancio e colora le strutture pi\u00f9 basiche.<\/li>\n<\/ul>\n\n\n\n<p class=\"has-text-align-left\">Quindi, in generale, il nucleo viene colorato di blu-violaceo ed il citoplasma di un colore rosa-arancio.<\/p>\n\n\n<div id=\"bmscience1759438017\" style=\"margin-top: 15px;margin-left: 15px;float: right;\"><a href=\"https:\/\/amzn.to\/45EsUyf\" target=\"_blank\" aria-label=\"Version 1.0.0\"><img loading=\"lazy\" decoding=\"async\" src=\"https:\/\/bmscience.net\/blog\/wp-content\/uploads\/2025\/06\/61a93d71-8df9-4d9d-be8c-f445700918d5.jpg\" alt=\"\"  srcset=\"https:\/\/bmscience.net\/blog\/wp-content\/uploads\/2025\/06\/61a93d71-8df9-4d9d-be8c-f445700918d5.jpg 300w, https:\/\/bmscience.net\/blog\/wp-content\/uploads\/2025\/06\/61a93d71-8df9-4d9d-be8c-f445700918d5-180x150.jpg 180w\" sizes=\"auto, (max-width: 300px) 100vw, 300px\" width=\"300\" height=\"250\"   \/><\/a><\/div>\n\n\n<p class=\"has-text-align-left\">La colorazione di <strong>Gomori<\/strong> \u00e8 una colorazione istologica elettiva che colora solo un determinato elemento, in questo caso si utilizza per colorare le fibre reticolari. Il colorante utilizzato \u00e8 a base di argento che ha una particolare affinit\u00e0 per le fibre reticolari. Ne deriva un tessuto in cui le fibre sono colorate di nero intenso su uno sfondo grigio-giallo.<\/p>\n\n\n\n<p class=\"has-text-align-left\">Le colorazioni <strong>Sudan III<\/strong> e <strong>Sudan Black<\/strong>&nbsp;vengono utilizzate per evidenziare le cellule adipose e soprattutto le goccioline lipidiche in esse contenute. Il Sudan III viene utilizzato per colorarle in giallo, mentre il Sudan Black per colorarli di nero.<br>Queste colorazioni vengono applicate ai campioni che sono stati sezionati con il criomicrotomo, perch\u00e9 la fissazione viene fatta fisicamente e quindi congelando il campione e non fissandolo chimicamente che potrebbe eliminare i lipidi.<\/p>\n\n\n\n<p class=\"has-text-align-left\">La colorazione di <strong>Nissl<\/strong> \u00e8 una colorazione elettiva che viene utilizzata per colorare specificatamente la zona tigroide di Nissl. Il colorante utilizzato \u00e8 il blu di Toluidina e viene utilizzato di solito su sezioni di paraffina che hanno 10&nbsp;\u00b5m di spessore. La colorazione tipica del blu di Toluidina \u00e8 una colorazione sul blu-azzurro.<\/p>\n\n\n<div class=\"wp-block-image\">\n<figure class=\"alignleft is-resized\"><a href=\"http:\/\/www.bmscience.net\/blog\/wp-content\/uploads\/2015\/05\/GolgiStainedPyramidalCell.jpg\"><img loading=\"lazy\" decoding=\"async\" width=\"409\" height=\"272\" src=\"http:\/\/www.bmscience.net\/blog\/wp-content\/uploads\/2015\/05\/GolgiStainedPyramidalCell.jpg\" alt=\"GolgiStainedPyramidalCell\" class=\"wp-image-9482\" style=\"width:321px;height:auto\" srcset=\"https:\/\/bmscience.net\/blog\/wp-content\/uploads\/2015\/05\/GolgiStainedPyramidalCell.jpg 409w, https:\/\/bmscience.net\/blog\/wp-content\/uploads\/2015\/05\/GolgiStainedPyramidalCell-300x200.jpg 300w\" sizes=\"auto, (max-width: 409px) 100vw, 409px\" \/><\/a><\/figure>\n<\/div>\n\n\n<p class=\"has-text-align-left\">La colorazione di <strong>Golgi-Cajal<\/strong> \u00e8 una colorazione istologica che \u00e8 specifica per il sistema nervoso centrale. Si prendono delle piccole sezioni &nbsp;fresche del sistema nervoso centrale, le si immergono per 1-6 giorni a 25 \u00b0C in una soluzione osmio-bicromica e successivamente in una soluzione di nitrato d&#8217;argento concentrato a 1% per 3 giorni. Una volta avvenuta la colorazione, si includono i pezzi in paraffina e si tagliano delle sezioni molto spesse di almeno 40-50&nbsp;\u00b5m per avere una visione abbastanza completa di tutti gli elementi. E&#8217; una colorazione abbastanza difficile da praticare che presenta ancora delle problematiche irrisolte. Di solito si ottiene un buon risultato quando si hanno le cellule nervose che spiccano di un colore nero intenso su uno sfondo color tabacco.<\/p>\n\n\n\n<p class=\"has-text-align-left\">Un&#8217;altra colorazione istologica \u00e8 il&nbsp;<strong>May-Grunwald-Giemsa<\/strong>, una colorazione specifica per il sangue in cui si <a href=\"http:\/\/www.bmscience.net\/blog\/come-si-prepara-uno-striscio-di-sangue\/\">striscia il sangue<\/a> su un vetrino portaoggetti che poi viene fissato per 30 minuti all&#8217;aria, in seguito viene colorato prima con la miscela May-Grunwald e poi viene lavato con il Giemsa. Il May-Grunwald \u00e8 formato da Blu di Metilene ed Eosina. Il primo \u00e8 un colorante basico, il secondo, come gi\u00e0 detto in precedenza, \u00e8 un colorante acido. Il Giemsa \u00e8 fatto da Eosina, Blu di Metilene, Azzurro A e B e Violetto di Metilene.<br>Il risultato che si ottiene \u00e8 che i globuli rossi risultano colorati di un rosa-arancio e i nuclei dei globuli bianchi in blu-violaceo.<\/p>\n\n\n<div id=\"bmscience1724740489\" style=\"margin-top: 15px;margin-bottom: 15px;margin-left: auto;margin-right: auto;text-align: center;\"><a href=\"https:\/\/amzn.to\/435LIEK\" target=\"_blank\" aria-label=\"Screenshot 2025-04-30 114327\"><img loading=\"lazy\" decoding=\"async\" src=\"https:\/\/bmscience.net\/blog\/wp-content\/uploads\/2025\/04\/Screenshot-2025-04-30-114327.png\" alt=\"\"  srcset=\"https:\/\/bmscience.net\/blog\/wp-content\/uploads\/2025\/04\/Screenshot-2025-04-30-114327.png 1391w, https:\/\/bmscience.net\/blog\/wp-content\/uploads\/2025\/04\/Screenshot-2025-04-30-114327-300x52.png 300w, https:\/\/bmscience.net\/blog\/wp-content\/uploads\/2025\/04\/Screenshot-2025-04-30-114327-1024x178.png 1024w, https:\/\/bmscience.net\/blog\/wp-content\/uploads\/2025\/04\/Screenshot-2025-04-30-114327-768x134.png 768w\" sizes=\"auto, (max-width: 1391px) 100vw, 1391px\" width=\"1391\" height=\"242\"  style=\"display: inline-block;\" \/><\/a><\/div>\n\n\n<h2 id=\"rtoc-2\"  class=\"wp-block-heading\">COLORAZIONI ISTOCHIMICHE:<\/h2>\n\n\n<div id=\"bmscience3540705818\" style=\"margin-top: 15px;margin-left: 15px;float: right;\"><a href=\"https:\/\/amzn.to\/4l0itd4\" target=\"_blank\" aria-label=\"Version 1.0.0\"><img loading=\"lazy\" decoding=\"async\" src=\"https:\/\/bmscience.net\/blog\/wp-content\/uploads\/2025\/07\/375c5d7b-d907-4b85-ab16-7da7edcd9a38.jpg\" alt=\"\"  srcset=\"https:\/\/bmscience.net\/blog\/wp-content\/uploads\/2025\/07\/375c5d7b-d907-4b85-ab16-7da7edcd9a38.jpg 300w, https:\/\/bmscience.net\/blog\/wp-content\/uploads\/2025\/07\/375c5d7b-d907-4b85-ab16-7da7edcd9a38-180x150.jpg 180w\" sizes=\"auto, (max-width: 300px) 100vw, 300px\" width=\"300\" height=\"250\"   \/><\/a><\/div>\n\n\n<p class=\"has-text-align-left\">La <strong>reazione PAS<\/strong> serve per mettere in evidenza le mucine neutre presenti negli epiteli secernenti e ghiandole endocrine, ma anche nel sistema nervoso. Per la reazione si utilizza innanzitutto un ossidante, l&#8217;acido periodico che attacca in maniera specifica il gruppo funzionale amminico primario delle mucine oppure il gruppo H. In seguito all&#8217;attacco viene liberato il gruppo aldeico che viene messo in evidenza dal colorante, il reattivo di Shiff. Questo colorante colora le mucine con il gruppo aldeico mostrato di un colore rosso porpora. Di solito questa reazione si esegue in associazione all&#8217;Alcian blu.<\/p>\n\n\n\n<p class=\"has-text-align-left\">Mentre la reazione PAS colora le mucine neutre, l&#8217;<strong>Alcian blu<\/strong> colora le mucine acide e i glicosamminoglicani. Entrambi devono avere i gruppi carbossilici COOH. Questa reazione di solito si esegue insieme alla reazione PAS in modo da avere un quadro completo delle mucine che sono presenti nel preparato, sia le mucine acide che quelle neutre.<\/p>\n\n\n\n<p class=\"has-text-align-left\">Un esempio di reazione combinata <strong>PAS-Alcian blu<\/strong> si utilizza per colorare alcune parti dello stomaco come l&#8217;antro.<\/p>\n\n\n\n<h2 id=\"rtoc-3\"  class=\"wp-block-heading\">COLORAZIONI IMMUNOISTOCHIMICHE:<\/h2>\n\n\n\n<p class=\"has-text-align-left\">La colorazione immunoistochimica sfrutta il legame antigene anticorpo. Gli anticorpi utilizzati per questa colorazione vengono trattati con l&#8217;aggiunta di un cromogeno che in seguito alla reazione anticorpo-antigene, viene eccitato da un laser che&nbsp;marcher\u00e0&nbsp;il cromogeno il quale render\u00e0 evidente la reazione avvenuta. In questo modo \u00e8 possibile osservare le cellule in cui \u00e8 avvenuta questa reazione.<\/p>\n\n\n<div id=\"bmscience1642377681\" style=\"margin-top: 15px;margin-bottom: 15px;margin-left: auto;margin-right: auto;text-align: center;\"><a href=\"https:\/\/amzn.to\/4oEoTiW\" target=\"_blank\" aria-label=\"9149HesJz0L._SX3000_\"><img loading=\"lazy\" decoding=\"async\" src=\"https:\/\/bmscience.net\/blog\/wp-content\/uploads\/2025\/12\/9149HesJz0L._SX3000_-scaled-e1765126382117.jpg\" alt=\"\"  srcset=\"https:\/\/bmscience.net\/blog\/wp-content\/uploads\/2025\/12\/9149HesJz0L._SX3000_-scaled-e1765126382117.jpg 2185w, https:\/\/bmscience.net\/blog\/wp-content\/uploads\/2025\/12\/9149HesJz0L._SX3000_-scaled-e1765126382117-300x60.jpg 300w, https:\/\/bmscience.net\/blog\/wp-content\/uploads\/2025\/12\/9149HesJz0L._SX3000_-scaled-e1765126382117-1024x204.jpg 1024w, https:\/\/bmscience.net\/blog\/wp-content\/uploads\/2025\/12\/9149HesJz0L._SX3000_-scaled-e1765126382117-768x153.jpg 768w, https:\/\/bmscience.net\/blog\/wp-content\/uploads\/2025\/12\/9149HesJz0L._SX3000_-scaled-e1765126382117-1536x306.jpg 1536w, https:\/\/bmscience.net\/blog\/wp-content\/uploads\/2025\/12\/9149HesJz0L._SX3000_-scaled-e1765126382117-2048x408.jpg 2048w\" sizes=\"auto, (max-width: 2185px) 100vw, 2185px\" width=\"2185\" height=\"435\"  style=\"display: inline-block;\" \/><\/a><\/div>","protected":false},"excerpt":{"rendered":"<p>La colorazione \u00e8 l&#8217;ultima fase della preparazione di un campione istologico. 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