In inglese blot, o blotting, significa trasferimento. Il western blotting consiste nel trasferimento di proteine da un supporto ad un altro, in genere dal gel a un altro supporto come la membrana di nitrocellulosa, oppure un polimero fatto di PVDF (PoliViniliDenFluoruro), un polimero sintetico su cui si possono legare le proteine.Il termine “western” ha un’origine…
Continue reading Tecniche per l’analisi delle proteine: Western Blotting
Una tecnica molto utilizzata nei laboratori è l’elettroforesi che si basa sulla capacità di movimento di molecole più o meno grandi quando vengono sottoposte a un campo elettrico. Due esempi importanti di macromolecole che possono essere separati tra di loro sfruttando questo principio sono gli acidi nucleici e le proteine. Proprio queste due macromolecole perché…
Continue reading Tecniche elettroforetiche per lo studio di proteine e nucleotidi
La spettrofotometria è una tecnica che si basa sulla capacità di interazione con le onde elettromagnetiche, cioè con la luce, da parte di moltissime molecole, tra cui le proteine che sono tra le biomolecole più rappresentanti che esprimono questa capacità. Lo strumento che permette di condurre questo tipo di analisi è lo spettrofotometro tramite cui…
Continue reading Analisi delle proteine tramite spettrofotometria
La cromatografia, è una tecnica di tipo separativo che si basa sull’utilizzazione di colonne e si sfrutta come principio di separazione la forza di gravità, che richiede un certo tempo abbastanza lungo. Per aumentare la velocità di discesa del campione la colonna può essere collegata ad una pompa peristaltica che applica una certa pressione e…
Continue reading Cromatografia a scambio ionico, per esclusione molecolare e per affinità
Il metodo del sequenziamento di proteine fu messo a punto da parte dello scienziato F. Sanger.La determinazione della sequenza primaria della catena polipeptidica attualmente viene fatta in maniera automatica in modo molto veloce da strumenti abbastanza complessi chiamati sequenziatori (automatici) che sono presenti disponibili in vari laboratori, mentre nel 1958, quando è stato messo a…
Continue reading Determinazione della struttura primaria di una proteina tramite sequenziamento
Un capitolo rilevante della chimica biologica che fa parte delle vie di trasduzione (trasferimento) all’interno della cellula è la modificazione post-traduzionale delle catene polipeptidiche. Può essere modificata la catena laterale covalentemente con l’aggiunta di un gruppo chimico. Il gruppo chimico che è maggiormente studiato e presente come modificazione covalente è il gruppo fosforico, infatti ci…
Continue reading Modificazioni covalenti sulle catene laterali degli amminoacidi
Molto importante per le proteine è la distinzione tra proteine semplici e proteine complesse o coniugate.Le proteine coniugate sono tutte quelle proteine che oltre alla catena polipeptidica contengono dei gruppi di natura chimica diversi. La diversa natura chimica del gruppo prostetico (non proteico) che è legato alla proteina ci permette di identificare varie classi di…
Continue reading Classificazione e livelli strutturali di una proteina
Il legame alla base della costituzione di una proteina è il legame peptidico, un particolare tipo di legame ammidico.È la reazione che avviene tra il gruppo carbossilico di un aminoacido e il gruppo amminico di un altro amminoacido. Quando queste reazioni si ripetono un numero n di volte otteniamo lo scheletro polipeptidico o la sequenza…
Continue reading Amminoacidi – Le caratteristiche del legame peptidico
Il nome più corretto degli amminoacidi, come nome generico, è in realtà alfa-amminoacidi perché il primo carbonio, legato al gruppo funzionale della molecola, che è il gruppo carbossilico, viene indicato con la lettera α. Tutti gli amminoacidi, sono rappresentati da una comune struttura di base che è caratterizzata dalla presenza di un carbonio centrale, che…
Esiste un’importante categoria di sostanze che sono classificate come Tamponi Biologici. All’interno del nostro organismo, affinché possano essere efficienti tutte le varie potenzialità dell’organismo, c’è bisogno del mantenimento intorno a valori prefissati molto precisi di alcuni parametri fisico-chimici tra cui la temperatura e il pH. La stragrande maggioranza degli enzimi hanno un optimum di funzionalità…
Continue reading Tamponi biologici: Istidina, Acido carbonico e Tampone fosfato
